GB 1886322-2021 英文版

　　本标准适用于以大豆或大豆粕为原料,经脱脂、提取、纯化、灭菌、干燥等工艺生产的食品添加剂可

　　本标准所用试剂和水在未注明其他要求时,均指分析纯试剂和GB/T 6682规定的三级水。试验中

　　所用标准溶液、杂质测定用标准溶液、制剂和制品在未注明其他要求时,均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时,均指水溶液。

　　A.2.5.1 标准曲线μL标准相对分子质量溶液(A.2.2.3)注入高效液相色谱仪,进行高效液相色谱分析,记

　　录色谱峰保留时间tR(min)。用lg(MW)对色谱峰保留时间作标准曲线 标准品相对分子质量与保留时间测定标准曲线 试样溶液制备

　　在相同条件下,取10μL试样溶液(A.2.5.2)注入高效液相色谱仪,进行高效液相色谱分析,记录色

　　谱峰保留时间tR(min)。根据保留时间tR(min)在图A.1中查出试样液各峰lg(MW)并计算出 MW。

　　可溶性大豆多糖典型高效液相色谱图见图A.2,其中4个峰相对分子质量范围分别为4.00×105~

　　6.50×105、1.00×105~3.00×105、1.50×104~3.50×104、2.00×103~1.00×104。如果试样溶液高效液相色谱图出现2~4个色谱峰,并且峰值在上述相对分子质量范围内,则判断试样是可溶性大豆多糖。

　　如果谱图中色谱峰是1个,或者色谱峰是2~4个,但峰值不在上述相对分子质量范围内,则判断试样不

　　试样经酶解,收集滤液并用乙醇沉淀,过滤、洗涤残渣并干燥至恒质后,减去其中蛋白质、灰分和试

　　箱储存,酶的活性测定及判定标准应符合GB 5009.88-2014附录A的要求。

　　储存,酶的活性测定及判定标准应符合GB 5009.88-2014附录A的要求。

　　24℃时调pH为8.2,28℃时调pH为8.1,20℃~28℃之间其他室温用插入法校正pH。加水稀释至

　　A.3.4.4 过滤坩埚:孔径40μm~60μm,清洗后的坩埚在525℃马弗炉中灼烧6h,炉温降至130℃以

　　下取出,于重铬酸钾洗液中室温浸泡2h,用水冲洗干净,再用15mL丙酮冲洗后风干。用前,加入约

　　A.3.4.5 真空抽滤装置:真空泵或有调节装置的抽吸器。备1L抽滤瓶,侧壁有抽滤口,带有与抽滤瓶

　　完全分散在缓冲液中(搅拌均匀,避免试样结成团块,以防止试样酶解过程中不能与酶充分接触)。同时

　　A.3.5.2 热稳定α-淀粉酶酶解:用移液枪向试样液中分别加入50μL热稳定α-淀粉酶液(A.3.2.4),用

　　铝箔覆盖(或加盖表面皿)后置于95℃水浴锅中持续搅拌,当水浴温度升至95℃开始计时,连续反应

　　30min。将烧杯取出,冷却至60℃,打开铝箔盖,用刮勺轻轻将附着于烧杯内壁上的胶状物刮下,并用

　　A.3.5.3 蛋白酶酶解:将试样溶液置于60℃水浴中,向每个烧杯中加入100μL蛋白酶溶液(A.3.3.3),

　　用铝箔覆盖(或加盖表面皿)后连续搅拌,反应30min。打开铝箔盖,边搅拌边加入5mL0.6mol/L盐

　　酸溶液,在60℃条件下,用1mol/L盐酸溶液调节试样溶液pH至4.0~4.7。

　　A.3.5.4 淀粉葡萄糖苷酶酶解:加入300μL淀粉葡萄糖苷酶液(A.3.2.6),用铝箔覆盖(或加盖表面皿)

　　坩埚中的硅藻土,并用抽滤装置将硅藻土均匀铺在坩埚滤层上,继续抽气,将上述酶消化液转移至坩埚

　　中抽滤。用10mL70℃水洗涤烧杯、残渣两次。合并滤液并转移至预先称量的500mL高型烧杯中,

　　A.3.5.6 沉淀:加入4倍于滤液体积并预热至60℃的95%乙醇,或用水将滤液调整至总质量为80g

　　藻土均匀铺在坩埚滤层上,继续抽气,将经醇处理的酶消解液全部转移至过滤坩埚中抽滤,并用78%的

　　A.3.5.8 洗涤:用15mL78%乙醇溶液洗涤残留物两次,再用15mL95%乙醇洗涤残留物两次,之后

　　用丙酮15mL洗涤残留物两次,抽滤去除洗涤液后,将含有残留物的坩埚及硅藻土置于105℃烘箱中

　　干燥过夜,将坩埚置干燥器中冷却0.5h后,称量(m1),精确到0.1mg。

　　A.3.5.9 蛋白质和灰分的测定:取两份试样中的一份按GB 5009.5测定氮(N)含量,以6.25为换算系

　　数,计算残留物中蛋白质质量(m3)。另外一份试样测定灰分,即在525℃马弗炉中灼烧5h,于干燥器

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