本标准第一法为高效液相色谱法,适用于添加了维生素B6 的食品测定;第二法为微生物法,适用于
试样经提取等前处理后,经C18色谱柱分离,高效液相色谱-荧光检测器检测,外标法定量测定维生
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
3.4.4 维生素B6 混合标准中间液(20μg/mL):分别准确吸取吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺的标准储备液各
3.4.5 维生素B6 混合标准系列工作液:分别准确吸取维生素B6 混合标准中间液0.5mL、1.0mL、
a) 固体试样:称取混合均匀的固体试样约5g(精确至0.01g),于150mL锥形瓶中,加入约25
mL45℃~50℃的水,混匀。加入约0.5g淀粉酶,混匀后向锥形瓶中充氮,盖上瓶塞,置50
b) 液体试样:称取混合均匀的液体试样约20g(精确至0.01g)于150mL锥形瓶中,混匀。加入
约0.5g淀粉酶,混匀后向锥形瓶中充氮,盖上瓶塞,置50℃~60℃培养箱内约30min。取出
a) 固体试样:称取混合均匀的固体试样约5g(精确至0.01g),于150mL锥形瓶中,加入约25
b) 液体试样:称取混合均匀的液体试样约20g(精确至0.01g)于150mL锥形瓶中。静置5min
用盐酸溶液,调节上述试样溶液的pH至1.7±0.1,放置约1min。再用氢氧化钠溶液调节试样溶
液的pH至4.5±0.1。把上述锥形瓶放入超声波振荡器中,超声振荡约10min。将试样溶液转移至
50mL容量瓶中,用水冲洗锥形瓶。洗液合并于50mL容量瓶中,用水定容至50mL。另取50mL锥
形瓶,上面放入漏斗和滤纸,把定容后的试样溶液倒入其中,自然过滤。滤液再经0.45μm微孔滤膜过
b) 流动相:甲醇50mL、辛烷磺酸钠2.0g、三乙胺2.5mL,用水溶解并定容到1000mL后,用冰
5.3 标准曲线 混合标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中,测定各组分的峰面积,以相应标准
将试样溶液注入高效液相色谱仪中,得到各组分相应的峰面积,根据标准曲线得到待测试样溶液中
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。
酵母菌在有维生素B6 存在的条件下才能生长,在一定条作下维生素B6 的量与其生长呈正比关系。用
比浊法测定该菌在试样液中生长的浑浊度,与标准曲线相比较得出试样中维生素B6 的含量。
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的二级水。培养基可使用符合
